醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))沉降菌的測試方法
國標(biāo)（GB）簡介：
“GB”代表中國國家標(biāo)準(zhǔn)，其中“G”和“B”分別取自“國標(biāo)”二字的漢語拼音首字母。國家標(biāo)準(zhǔn)分為兩類：強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)（GB）和推薦標(biāo)準(zhǔn)（GB/T）。推薦標(biāo)準(zhǔn)帶有“/T”，其中“T”代表“推薦”的漢語拼音首字母。
了解GB/T16294-2010：
GB/T16294-2010是針對醫(yī)藥工業(yè)潔凈室及潔凈區(qū)的沉降菌測試和環(huán)境驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)。盡管它是特定于潔凈區(qū)的，但也可用于評估任何環(huán)境中的污染程度。
一、GB/T16294-2010解讀
1. 適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)的沉降菌測試。實(shí)際上，它可以用于任何需要評估潔凈度的環(huán)境。
2. 基本概念
- 沉降菌：指通過自然沉降到培養(yǎng)皿中的活微生物粒子。
- 沉降菌菌落數(shù)：通過計(jì)算每個培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來評估潔凈度。
3. 測試方法
- 通過讓空氣中的微生物自然沉降到培養(yǎng)皿中，然后在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，直到可以肉眼觀察到菌落。
- 需要專業(yè)人員執(zhí)行，但具備相關(guān)知識和技能的人也可以進(jìn)行。
4. 測試準(zhǔn)備
- 所用物品必須提前嚴(yán)格消毒。
- 需要設(shè)立空白對照組以確保準(zhǔn)確性。
5. 培養(yǎng)基選擇
- 可以選擇大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏培養(yǎng)基（SDA），或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。
- 可以使用90mm×15mm高硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿或一次性培養(yǎng)皿。
6. 測試點(diǎn)布置
- 平板放置位置應(yīng)參照GB16292-2010，并考慮關(guān)鍵設(shè)備和活動范圍。
- 平板應(yīng)放置在氣流相對穩(wěn)定的區(qū)域，采樣點(diǎn)高度一般在0.8m至1.5m之間。
7. 菌落計(jì)數(shù)
- 按照每個培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。
- 若空白對照污染，試驗(yàn)結(jié)果無效，需重新測試。
二、潔凈室沉降菌的詳細(xì)測試方法
1. 制備固體培養(yǎng)基
- 參照“微生物菜譜-培養(yǎng)基”相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行制備。
2. 布置固體平板位置
- 參照GB16292-2010進(jìn)行平板位置布置，并確保培養(yǎng)皿數(shù)量符合要求。
3. 沉降采樣
- 在布置好的位置放置至少兩個平板（一個實(shí)驗(yàn)組，一個空白對照），并標(biāo)記。
- 打開實(shí)驗(yàn)組平板蓋進(jìn)行采樣，對照組保持封閉。
- 微生物沉降一定時間后，合上實(shí)驗(yàn)組平板蓋。
4. 培養(yǎng)
- 將實(shí)驗(yàn)組和對照組平板放置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。
5. 計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)
- 培養(yǎng)結(jié)束后，直接觀察并計(jì)數(shù)菌落。
6. 評估潔凈室潔凈度
- 潔凈室的等級數(shù)字越小，表示潔凈度越高，污染程度越低。
三、操作技巧和注意事項(xiàng)
1. 所有儀器和試劑必須嚴(yán)格滅菌，以保證測試的可靠性。
2. 可以提前兩天制作固體平板，并進(jìn)行空培養(yǎng)兩天，以防止平板污染。
3. 測試前檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，剔除變質(zhì)、破損或污染的皿。
4. 采樣時盡量減少人員流動。
5. 每個采樣點(diǎn)至少放置三個平皿，并設(shè)立空白對照組。
6. 計(jì)數(shù)時要仔細(xì)辨別所有菌落，包括重疊的菌落。
7. 試驗(yàn)過程中，記錄溫度、濕度、人員流動、培養(yǎng)及成分等信息。
8. 若空白對照污染，試驗(yàn)結(jié)果無效，需重新測試。
文稿來源：全國標(biāo)準(zhǔn)信息服務(wù)平臺